目的

观察白藜芦醇对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的作用，并研究其对心肌细胞叉头转录因子O1(FoxO1)/锰超氧化物歧化酶(MnSOD)信号通路的影响。

方法

应用细胞培养技术培养新生大鼠心肌细胞，胰酶消化，差数贴壁法体外分离培养大鼠心肌细胞。将心肌细胞分为5组，分别为对照组(不加任何干预因素)、AngⅡ(10–6mol/L)组(AngⅡ组)、AngⅡ(10–6mol/L)＋白藜芦醇(10μmol/L)组[AngⅡ＋白藜芦醇(10μmol/L)组]、AngⅡ(10–6μmol/L)＋白藜芦醇(25μmol/L)组[AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组]和AngⅡ(10–6μmol/L)＋白藜芦醇(50μmol/L)组[AngⅡ＋白藜芦醇(50μmol/L)组]。3H–亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率(心肌细胞肥大的指标)，相差显微镜测量细胞大小(细胞直径)，实时定量聚合酶链反应检测A型利钠肽(ANP)mRNA表达水平，蛋白免疫印迹法检测心肌细胞MnSOD、FoxO1和乙酰化FoxO1蛋白表达水平，免疫共沉淀法检测Sirt1与FoxO1的相互结合水平。

结果

AngⅡ组心肌细胞蛋白质合成速率明显大于对照组[(±)计数·min–1·孔–1比(±)计数·min–1·孔–1，P0.05]，AngⅡ＋白藜芦醇(10μmol/L)组、AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组和AngⅡ＋白藜芦醇(50μmol/L)组则均明显低于AngⅡ组(P均0.05)，且以AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组最为显著[(±)计数·min–1·孔–1]。AngⅡ组心肌细胞直径大于对照组[(29.3±3.2)μm比(19.4±1.8)μm，P0.05]，AngⅡ＋白藜芦醇(10μmol/L)组、AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组和AngⅡ＋白藜芦醇(50μmol/L)组则均小于AngⅡ组(P均0.05)，且以AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组最为显著[(20.8±2.1)μm]。AngⅡ组心肌细胞ANPmRNA表达水平高于对照组(4.4±0.4比1.0±0.1，P0.05)，AngⅡ＋白藜芦醇(10μmol/L)组、AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组和AngⅡ＋白藜芦醇(50μmol/L)组则均低于AngⅡ组(P均0.05)，且以AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组最为显著(2.2±0.2)。AngⅡ组心肌细胞MnSOD蛋白表达水平和活性均明显低于对照组(P均0.05)，AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组心肌细胞MnSOD蛋白表达水平和活性则均明显高于AngⅡ组(P均0.05)。AngⅡ组心肌细胞Sirt1与FoxO1的相互结合水平低于对照组(1.00±0.11比1.63±0.16，P0.05)，而乙酰化FoxO1的表达水平则高于对照组(1.48±0.16比1.00±0.13，P0.05)，而AngⅡ＋白藜芦醇(25μmol/L)组心肌细胞Sirt1与FoxO1的相互结合水平高于AngⅡ组(1.64±0.16,P0.05)，乙酰化FoxO1的表达水平则低于AngⅡ组(0.79±0.07,P0.05)。

结论

白藜芦醇可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，其作用机制可能与激活Sirt1，降低乙酰化FoxO1的表达有关，提示Sirt1可能是治疗心肌细胞肥大的潜在靶点。

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